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微流控單細胞包封系統(tǒng)
點擊次數(shù)：762 更新時間：2022-12-07
 

微液滴的單細胞包封是采用微流控系統(tǒng)生成微液滴進行單細胞包封的技術，采用壓力控制器驅動的微流控裝置可生產(chǎn)皮升級大小的液滴，可在單細胞水平上進行Hela等細胞的包封及進一步的分析。Elveflow 提供微流控單液滴包封的全套儀器設備及相關的用戶指導手冊，用于微液滴的單細胞包封及單細胞測序。

微流控單細胞包封的應用包括:

腫瘤學（洞察小細胞亞群攜帶的突變）

免疫學（區(qū)分不同的免疫細胞群或表征免疫細胞群）

神經(jīng)學（獲取詳細的單細胞圖譜，以了解和識別大腦中不同類型的神經(jīng)元及其連接分子）

發(fā)育生物學（逐個細胞繪制胚胎的整個發(fā)育過程）

單細胞組學（揭示組織樣本的細胞異質性）

Elveflow 采用微液滴進行單細胞包封的儀器配置如下：

  1. OB1 壓力控制器，至少有兩個      0–2000 mbar 通道

  2. 1 xMFS2 流量傳感器，0.4–7 μL/min，用于油相溶液

  3. 1 Xmfs3 流量傳感器      4.2–80 μL/min，用于細胞懸液

  4. 1 x 套件魯爾鎖啟動連接件

  5. 2 x 15 mL 儲液管

  6. 具有疏水通道的微流控芯片

  7. 用于觀察的顯微鏡

  8. 用于成像的攝像頭（可選）

  9. HF5-7500 +      1 % FluoSurf表面活性劑

  10. Aquapel用于疏水處理（可選）

微流控芯片是微液滴單細胞包封的關鍵部件，可采用流動聚焦的微流控微液滴生成芯片，材質是PDMS ，微通道可以用Aquapel進行處理，形成疏水性的微流體通道。

Fluidic 947 微液滴生成芯片，可獲得10-30μm的液滴。

Fludic 440 微液滴生成芯片，可獲得50-80μm的液滴

單細胞包封微流控芯片，生成20-50 μm的液滴。

這些芯片有2個入口，1個出口，入口分別是細胞懸浮液和油相，可實現(xiàn)單細胞包封。

如果想進行單細胞包封后測序，可采用4個入口和1個出口的微流控芯片，4個入口分別用于細胞懸浮液，Barcoded 水凝膠珠，裂解緩沖液和油相。

例如采用細胞溶液,13.57X105細胞/ml, 生微液滴平均直徑為51.2μm（CV=2.4%）。

參考文獻：Collins. D et al (2015), “The Poisson distribution and beyond: methods for microfluidic droplet production and single cell encapsulation". Lab on a Chip, 15, 3439-3459. 
 
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